Sistema de triagem de alto conteúdo CellVoyager CV8000

Um método de varredura múltipla de propriedade da Yokogawa que utiliza aproximadamente 1.000 feixes de laser na região de observação e discos em tandem girando em alta velocidade. Os discos compreendem um disco de matriz de orifícios com aproximadamente 20.000 orifícios dispostos em um padrão espiral de passo igual e um disco de matriz de microlentes que focaliza o laser de luz de excitação em orifícios individuais. Isso não apenas permite a geração de imagens em alta velocidade, mas também evita em grande parte a fototoxicidade e a fotobranqueamento da fluorescência.

Dois tipos diferentes de discos pinhole (25/50μm) podem ser usados, de acordo com a amostra. Para amostras espessas, a redução do diâmetro do pinhole permite maior confocalidade e imagens mais nítidas. Para amostras escuras, o aumento do diâmetro do pinhole permite imagens mais brilhantes.

Exemplo de geração de imagens de organoides Orifício superior: 25 μm Orifício inferior: 50 μm

A configuração do sistema óptico pode ser selecionada de acordo com a finalidade. Uma única placa de 96 poços pode ser fotografada em quatro cores em um minuto com a conexão de quatro câmeras sCMOS de campo amplo de alta sensibilidade. O sistema também é compatível com o ensaio FRET e CellPainting.

As lentes de imersão em água são excelentes na captura de imagens de alta resolução de células em um líquido. O CV8000 pode ser equipado com lentes objetivas de imersão em água de 20x, 40x ou 60x. Nossa lente de 40x é uma lente particularmente exclusiva, capaz de correção de aberração esférica altamente avançada, permitindo a captura de imagens brilhantes de alta resolução em todo o campo de visão. O fornecimento de água para as lentes também é totalmente automatizado. Esse equipamento possibilita a triagem de alto rendimento por meio de lentes de submersão em água.

A incubadora de estágio apresenta uma construção hermética, gerenciando a umidade, a temperatura e o CO ₂ níveis. O pipetador robótico integrado conduz o seguinte processo de forma totalmente automática: coleta da ponta → coleta do reagente da placa de reagente → adição do reagente à placa de amostra → descarte da ponta. Além de as imagens poderem ser obtidas rapidamente antes e depois da instilação do reagente, também é possível adicionar reagentes a poços individuais várias vezes e ajustar a velocidade de adição etc., ampliando a faixa de observação dinâmica por meio da instilação do reagente.

Comparação da multiplicação de células com o CO ₂ incubadora após 72 horas de incubação（n=3）

• 96 média do poço: 90
• Média dos 36 poços mais externos: 81
• Média de 60 poços (excluindo o mais externo): 96

Os valores representam o seguinte: Área total do CV8000 após 72 horas / Área total às 0 horas (doravante denominada razão da área total) / razão da área total da _{incubadora de CO2} x 100.
(Os números próximos a 100 significam que a multiplicação de células foi aproximadamente igual para o CV8000 e _{a incubadora de CO2}).
Foi verificada uma multiplicação de células próxima à da _{incubadora de CO2}, excluindo os quatro poços de canto.

Curvas de multiplicação de células para cada poço de uma placa de 96 poços

• Eixo vertical: Área total
• Eixo horizontal: Tempo (0-72 horas)

A multiplicação celular foi baixa nos quatro poços de canto; no entanto, continuou nos outros poços.

Proporção de área total após o início do cultivo (24, 48 e 72 horas) (n=3)

Excluindo os quatro poços de canto, mesmo após 72 horas, não houve grandes diferenças na multiplicação de células.
A baixa variação na velocidade de multiplicação celular entre os poços pode ser observada 24 horas 48 horas 72 horas.