Sistema de alto rendimiento CV8000

Se actualiza el software de análisis de alto contenido CellPathfinder.
Se lanza la opción Deep Learning.:Acerca de Deep learning.

El CV8000 incorpora un incubador celular con un diseño hermético mejorado que facilita la observación del comportamiento celular durante largos periodos de tiempo. Además, el CV8000 viene con CellPathfinder, un nuevo programa que puede analizar imágenes de células no etiquetadas e imágenes 3D de muestras. Con estas características, la CV8000 mejora la eficiencia de la investigación para el descubrimiento de fármacos y la investigación biomédica en temas de vanguardia como las células iPS y ES.

Aspectos destacados del sistema CV8000

Longitud de onda del láser de excitación 405nm、445nm、488nm、561nm、640nm
Fuente de iluminación Láser
Objetivo De 2x a 60x
(Seco, Contraste de fases, Inmersión en agua, Larga distancia de trabajo)
Cámara Cámara sCMOS de alta sensibilidad (hasta 4 unidades)
Autoenfoque Modo láser, modo imagen
Software CellPathfinder、Biblioteca celular

 

Introducción

Valle de la muerte

En el mercado del desarrollo de fármacos, la demanda de sistemas de análisis de alto contenido para la evaluación de la eficacia de los medicamentos está aumentando en consonancia con las necesidades de ensayos basados en células y cribado fenotípico. Para aumentar la eficacia del cribado, se necesitan dispositivos con mayor velocidad (mayor rendimiento).
Por otro lado, para superar el "valle de la muerte" del proceso de desarrollo de fármacos, es preciso aumentar la calidad de los resultados del cribado.
Esto requiere la construcción de sistemas de evaluación más complejos que utilicen parámetros multifacéticos mediante sistemas de cultivo en 3D, imágenes de células vivas y análisis de imágenes con mayor detalle.
En la investigación actual sobre el desarrollo de fármacos, es importante determinar cómo llevar a cabo paralelamente el cribado de rendimiento y el cribado de sistemas de evaluación complejos.

Solución

El CellVoyager CV8000 es un sistema de análisis de alto contenido y gama alta que resuelve este contradictorio reto de cribado.
Mediante la combinación de un escáner confocal de alta velocidad patentado de Yokogawa, lentes de inmersión en agua, hasta cuatro cámaras de alto campo de visión, una platina microscópica con entorno de cultivo celular y una pipeta robótica integrada, hemos conseguido no solo imágenes de alto rendimiento y alta resolución, sino también un cribado fenotípico mediante un sistema de evaluación más complejo.
Además, nuestro software de análisis especializado, CellPathfinder, utiliza deep leaning y aprendizaje automático para reconocer objetos objetivo con gran precisión, apoyándole desde el análisis de imágenes hasta la visualización de resultados mediante gráficos.

La ventaja Yokogawa

  • Unidad de escáner confocal
  • Compatible con experimentos en vivo/cinéticos
  • Alto rendimiento
  • Tecnología fiable y probada

Viaje a mundos desconocidos

Imágenes confocales en tiempo real, Sin etiqueta

Imágenes de vida a largo plazo

Imágenes de células vivas a largo plazo

Incubadora de etapas incluida de serie. Observación ininterrumpida y de larga duración (3 días o más) de la humedad, la temperatura y el CO 2 control.

Izquierda:Antes de la incubación Derecha:Después de 68 horas de incubación.

Ensayo cinético

Ensayo cinético

La adición de fármacos durante la obtención de imágenes es posible gracias a una pipeta robótica integrada con puntas desechables.
Ideal para experimentos cinéticos que implican la observación de fenómenos de alta velocidad.

Izquierda:Antes de la incubación Derecha:Después de la estimulación

Organoide / Esferoide

Organoide / Esferoide

Yokogawa La tecnología confocal de disco giratorio destaca en la obtención de imágenes de muestras con profundidad, como las muestras de cultivos en 3D, en las que es difícil obtener imágenes claras y rápidas, lo que permite una evaluación cercana a la calidad in vivo.

Izquierda:Imagen original Derecha:Imagen de reconocimiento

Análisis sin etiquetas

Análisis sin etiquetas

El reconocimiento y el análisis pueden realizarse tomando imágenes de campo claro desde varias posiciones Z y creando una imagen de campo claro CE mediante el software de análisis CellPathfinder incluido. La precisión del análisis se mejora aún más mediante la nueva opción Deep Learning.

Izquierda:CE Campo claro Derecha:Imagen de reconocimiento celular.

Detalles

Tecnología punta que le permite hacer lo que quiera

Observar las células tal y como son -Sistema confocal de doble disco giratorio-.

Sistema confocal de doble disco giratorio

Un método patentado de exploración múltiple Yokogawa que utiliza aproximadamente 1.000 rayos láser en la región de observación y discos en tándem que giran a gran velocidad. Los discos constan de un disco de matriz de agujeros de alfiler con aproximadamente 20.000 agujeros de alfiler dispuestos en un patrón espiral de igual paso, y un disco de matriz de microlentes que enfoca el láser de luz de excitación en agujeros de alfiler individuales. Esto no sólo permite obtener imágenes a alta velocidad, sino que también evita en gran medida la fototoxicidad y el fotoblanqueo de la fluorescencia.

Observación más profunda y clara -Intercambiador de discos de orificio-.

Intercambiador de discos pinhole
 
Intercambiador de discos pinhole

Pueden utilizarse dos tipos diferentes de discos estenopeicos (25/50μm), en función de la muestra. En el caso de muestras gruesas, la reducción del diámetro de los agujeros de alfiler permite obtener imágenes de mayor confocalidad y más perfiladas. Para muestras oscuras, aumentar el diámetro del agujero de alfiler permite obtener imágenes más brillantes.

Ejemplo de imagen de organoide Agujero superior:25μm Agujero inferior:50μm.

Cribado de mayor rendimiento -Configuración óptica-.

Configuración óptica

La configuración del sistema óptico puede seleccionarse en función del objetivo. Una sola placa de 96 pocillos se puede visualizar en cuatro colores en un minuto conectando cuatro cámaras sCMOS de campo amplio y alta sensibilidad. El sistema también es compatible con los ensayos FRET y CellPainting.

Captura de estructuras más finas -Original lente de inmersión en agua-.

lente de inmersión en agua

Los objetivos de inmersión en agua destacan en la captura de imágenes de alta resolución de células dentro de un líquido. La CV8000 puede equiparse con un objetivo de inmersión en agua de 40x o 60x. Nuestro objetivo de 40 aumentos es un objetivo especialmente exclusivo capaz de realizar una corrección muy avanzada de la aberración esférica, lo que permite capturar imágenes brillantes de alta resolución en un campo amplio completo. El suministro de agua del objetivo también está completamente automatizado. Este equipo hace posible el cribado de alto rendimiento mediante lentes de inmersión en agua.

Captura del movimiento de células vivas -Incubadora de alta precisión y pipeteador robotizado-.

robot pipeteador

La incubadora de platina tiene una construcción hermética que controla la humedad, la temperatura y el CO 2 niveles. La pipeta robótica integrada realiza el siguiente proceso de forma totalmente automática: recogida de la punta → recogida del reactivo de la placa de reactivos → adición del reactivo a la placa de muestras → eliminación de la punta. No sólo se pueden obtener imágenes rápidamente antes y después de la instilación de reactivos, sino que también es posible añadir reactivos a pocillos individuales varias veces, y ajustar la velocidad de adición, etc., ampliando el rango de observación de la dinámica mediante la instilación de reactivos.

Un sistema HCA total más respetuoso con las células vivas

Posibilidad de obtener imágenes de células vivas de larga duración.

Se sembraron células HeLa en una placa de 96 pocillos a una densidad de 500 células por pocillo, y se cultivaron durante 24 horas. A continuación, se colocó la placa de pocillos en la incubadora de fase interna y se realizó el cultivo celular durante 72 horas s, analizándose el área total (en lo sucesivo, Área Total) ocupada por las células. Como resultado, se observó un desnivel mínimo en la multiplicación celular a lo largo de los 96 pocillos (excluyendo los cuatro pocillos de las esquinas) en comparación con un incubador de CO2 normal.

Comparación de la multiplicación celular con el incubador de <sub>CO2</sub> normal tras 72 horas de incubación

Comparación de la multiplicación celular con el incubador de CO2 normal tras 72 horas de incubación(n=3).

  • 96 pozo media: 90
  • Media de los 36 pozos más alejados: 81
  • Media de 60 pozos (excluidos los más alejados): 96

Los valores representan lo siguiente Área total del CV8000 después de 72 h / Área total a las 0 h (en adelante, ratio de Área total) / ratio de Área total del CO2incubador x 100.
(Los números cercanos a 100 me indican que la multiplicación celular fue aproximadamente igual para el CV8000 y el CO2incubador).
Se verificó una multiplicación celular cercana a la del incubador de CO2, excluyendo los cuatro pocillos de las esquinas.

Curvas de multiplicación celular para cada pocillo de una placa de 96 pocillos

Curvas de multiplicación celular para cada pocillo de una placa de 96 pocillos

  • Eje vertical: Superficie total
  • Eje horizontal: Tiempo (0-72 horas)

La multiplicación celular fue baja en los cuatro pocillos de las esquinas; sin embargo, continuó en los demás pocillos.。

Proporción de la superficie total tras el inicio del cultivo

Proporción de superficie total tras el inicio del cultivo (24, 48 y 72 horas) (n=3)

Excluyendo los cuatro pocillos de las esquinas, incluso después de 72 horas, no se observaron grandes diferencias en la multiplicación celular.
Se puede observar la escasa variación en la velocidad de multiplicación celular entre los pocillos 24 horas 48 horas 72 horas.

More info Evaluation of cell-culture condition in CV8000’s internal stage incubator

Integración de sistemas

Gestión centralizada de procesos, desde el entorno de cultivo hasta la transferencia, la obtención de imágenes, el análisis y la gestión de datos.
Ofrecemos sistemas óptimos en respuesta a las necesidades de nuestros clientes.

Integración de sistemas

Software de análisis de alto contenido CellPathfinder

El software analiza los datos de imagen capturados con el CV8000, crea gráficos y exporta diversos datos. Tanto los usuarios principiantes como los expertos pueden sacar el máximo partido del software, gracias a la abundancia de plantillas y a la capacidad de edición flexible de protocolos. Las funcionalidades de campo claro CE y aprendizaje automático hacen posible el análisis de Sin etiqueta. También se ha añadido la nueva opción Deep Learning, que mejora en gran medida la precisión del reconocimiento celular.

More info High Content Analysis Software CellPathfinder

Sólo tiene que hacer clic en la opción del menú Análisis

Sólo tiene que hacer clic en la opción del menú Análisis

Basta con seguir el flujo que aparece en la parte superior de la pantalla. El menú de análisis tiene iconos fáciles de entender. Simplemente haga clic en el elemento de menú deseado y el protocolo se cargará.

Resultados rápidos para verificación y estudio inmediatos

Resultados rápidos para verificación y estudio inmediatos

Los datos numéricos calculados pueden visualizarse de diversas formas. Los gráficos y las imágenes de celdas están vinculados, lo que facilita la verificación y consulta de los resultados.

Evaluación imparcial del fenotipo mediante IA

Evaluación imparcial del fenotipo mediante IA

El aprendizaje automático también permite digitalizar sin sesgos los experimentos evaluados visualmente. El reconocimiento automático es posible simplemente haciendo clic en la forma que desea que el software aprenda.

Análisis de fenotipos sin etiquetas

Análisis de fenotipos sin etiquetas

Elimina el tiempo, el coste y la influencia en las células asociados al etiquetado celular. La combinación con el aprendizaje profundo hace posible una clasificación de precisión aún mayor.

Especificaciones

Sistema de descubrimiento citológico de alto rendimiento

Modelo CV8000
Ejemplo de formato Placa de pocillos múltiples (6, 12, 24, 48, 96, 384, 1536 pocillos), portaobjetos de vidrio
Modo de imagen Modo confocal: máx. Grabación simultánea en 4 colores
Campo claro/contraste de fase (10x, 20x para placas de 6, 12, 24 pocillos), contraste de fase digital (10x, 20x)
Formato de los datos de salida Datos de imagen: 16bit TIFF, PNG
Datos numéricos: CSV, formato original
Longitud de onda de excitación 405/445/488/561/640 nm, todo láser sólido, máx. 5 láseres
【Opción】365 nm LED
Iluminación con luz blanca LED
Autoenfoque Modo láser, modo imagen
Objetivos Máx. 6 objetivos disponibles, conmutables automáticamente
En seco: 2x, 4x, 10x, 20x, 40x Inmersión en agua: 20x, 40x, 60x
Tiene contraste: 10x, 20x Larga distancia de trabajo: 20x
Unidad confocal Escáner confocal de disco Nipkow dual de visión amplia mejorado con microlente, agujero de alfiler de 50 μm.
【Option】 Disco de agujero de alfiler de 25 μm e intercambiador automático de discos de agujero de alfiler.
Cámara sCMOS (píxeles efectivos: 2000X2000 tamaño de píxel: 6,5 μm), máx. 4 cámaras
Incubadora de etapas Temperatura de incubación : 35-40℃ Caja de suministro de​ ​CO2 (CO2: 5%, humidificación forzada)

Robot pipeteador

【Opción】 Tipo de punta desechable (tipo 96tip o 384tip).
Lector de códigos de barras 【Opción】 1 o 2 dimensiones
Puestos de trabajo Estación de trabajo de doble monitor para control de sistemas, estación de trabajo de doble monitor para Análisis de datos
Software de análisis Software de análisis de alto contenido CellPathfinder
Granularidad, Neurita, Morfología nuclear, Translocación nuclear, Translocación de la membrana plasmática, Aprendizaje automático, Análisis sin etiquetas, Análisis 3D, Aprendizaje profundo, etc.
Entorno operativo 15~30℃ 30~70%RH (sin condensación)
Energía suministro Unidad de medición:AC100-240V, 50/60Hz, 2KVA máx.
Estación de trabajo para el control del sistema:AC100-240V, 50/60Hz, 1,3KVA máx.
Estación de trabajo para análisis de datos:AC100-240V, 50/60Hz, 950VA máx.
Dimensiones Unidad de medida: A1.280×P895×Al1.450 mm
Peso Unidad de medida: 510Kg

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Recursos

Descripción General:

El software de análisis de translocación nuclear CV8000 permite analizar los cambios en la localización de moléculas de señalización que se transfieren entre el citoplasma y el núcleo, como las proteínas. A continuación se muestra un ejemplo del análisis de translocación de NFκB, un factor de transcripción.

Nota de aplicación
Nota de aplicación
Descripción General:

El indicador del ciclo celular basado en la ubiquitinación fluorescente (Fucci) es un conjunto de sondas fluorescentes que permite visualizar la progresión del ciclo celular en células vivas.

Industrias:
Informe técnico de Yokogawa
1,2 MB
Informe técnico de Yokogawa
2,2 MB
Publicación en los medios de comunicación
Descripción General:

Lista de publicaciones seleccionadas : CV8000, CV7000, CV6000

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Descripción del Producto
Descripción General:

El CV8000 incorpora un incubador celular con un diseño hermético mejorado que facilita la observación del comportamiento celular durante largos periodos de tiempo. Además, el CV8000 viene con CellPathfinder, un nuevo programa que puede analizar imágenes de células no etiquetadas e imágenes 3D de muestras. Con estas características, la CV8000 mejora la eficiencia de la investigación para el descubrimiento de fármacos y la investigación biomédica en temas de vanguardia como las células iPS y ES.

Descripción General:

YOKOGAWA contribuirá a la evolución tecnológica, sobre todo en herramientas de medición y análisis, para ayudar a construir un mundo en el que los investigadores se centren cada vez más en la interpretación perspicaz de los datos y en el avance de Ciencia de la vida en beneficio de la humanidad.

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