You can watch webinars by SS2000 users.
①Single Live Cell Mass Spectrometry (SiLC-MS) Analysis
Presenter: Carla Newman (Scientific Leader (Celluar Imaging and Dynamics), GSK)
②Novel tissue imaging, profiling and single-cell sampling approaches
Presenter: Prof. Melanie Bailey (Professorial Research Fellow in the Department of Chemistry at the University of Surrey)
Sistema de muestreo subcelular
El SS2000 es un sistema que muestrea automáticamente regiones específicas de células o células enteras a nivel unicelular mientras obtiene imágenes de células en cultivo con un microscopio confocal. Como no es necesario separar las células en cultivo, se mantiene la información posicional y morfológica.
Funciones de muestreo
- Funcionamiento automático.
- Control preciso del pipeteado de los trabajos de localización.
- Muestreo con información sobre localización y morfología.
- Imágenes de alta resolución y análisis de imágenes mediante microscopía confocal.
- Función de incubadora para mantener la actividad celular.
Casos prácticos
- Los componentes intracelulares pueden muestrearse a nivel unicelular. Esto incluye componentes intracelulares difíciles de muestrear por métodos bioquímicos, como los orgánulos sin membranas lipídicas.
- Al muestrear manteniendo la información posicional, es posible muestrear y analizar las células normales adyacentes a las células cancerosas y las células normales situadas lejos de las células cancerosas.
- El muestreo es posible manteniendo la información morfológica. Permitiendo que células con diferentes cambios morfológicos puedan ser muestreadas y comparadas.
- Se pueden tomar muestras de distintas partes de una neurona, como el cuerpo celular o el axón.
- La clonación unicelular es posible a partir de células específicas o células con un comportamiento específico bajo observación microscópica, como células transfectadas o células resistentes a virus. Combinando diversas técnicas de análisis de imágenes, es posible una clonación precisa y eficiente.
- Se pueden recoger varias muestras en el mismo pocillo para realizar análisis que requieran un volumen de muestra.
Detalles
Muestreo subcelular
A diferencia de los dispositivos de aislamiento celular existentes, el SS2000 no sólo puede aislar una célula completa, sino también tomar muestras únicamente del lugar objetivo dentro de la célula. Es posible muestrear selectivamente el citoplasma y las regiones que contienen los orgánulos objetivo.
Tras la tinción de los núcleos (azul), el citoplasma (verde) y las mitocondrias (rojo) de las células HeLa, se tomó una muestra de una región rica en mitocondrias (flecha) del citoplasma.
Mantenimiento de la información posicional y morfológica de las células
Dado que sólo se pueden muestrear las células diana sin desprender las células en cultivo, es posible muestrear manteniendo la información posicional y morfológica.
Se co-cultivaron células MDCK normales y células MDCK anormales marcadas con fluorescencia verde en una proporción de 50:1. Se tomaron muestras de una célula normal adyacente a la célula anormal que mostraba señales fluorescentes (flechas). Se tomó una muestra de una célula normal adyacente a la célula anormal que presentaba señales fluorescentes (flechas).
Muestras de alta usabilidad
Las muestras pueden recogerse en placas PCR y microplacas y recoger varias muestras en el mismo pocillo. Las muestras también pueden tomarse mientras se mantienen en la punta de vidrio sin ser expulsadas. El lugar de recogida tiene una función de refrigeración para suprimir la degradación de la muestra y una función de incubadora para mantener el entorno de cultivo. Estas muestras pueden utilizarse para análisis genéticos, espectrometría de masas y clonación unicelular.
Imágenes de células vivas con microscopía confocal
El SS2000 utiliza productos de obtención de imágenes de células vivas desarrollados por Yokogawa. Es posible obtener imágenes tridimensionales de alta velocidad y alta resolución utilizando nuestra exclusiva tecnología de microscopio confocal. Se pueden tomar muestras de las células seleccionadas con un microscopio confocal en un entorno de incubadora. También es posible la fotografía con lapso de tiempo, lo que permite captar cambios dinámicos en la Célula objetivo. Dado que es posible grabar imágenes en movimiento durante la toma de muestras e imágenes antes y después de la toma de muestras, es posible comparar los resultados del análisis de las muestras recogidas con los datos de las imágenes celulares.
Las células objetivo y las posiciones de muestreo pueden seleccionarse automáticamente mediante el análisis de imágenes. (Los objetivos pueden seleccionarse automáticamente según la forma de las células, el tamaño de los núcleos, la densidad de los orgánulos, etc.).
Especificaciones del producto
| Funciones de muestreo automático | Diámetro de la punta | 3μm, 5μm, 8μm, 10μm |
|---|---|---|
| Entorno del cargador de la incubadora | 37℃, 5％CO2, humidificado | |
| Entorno del cargador de recogida | 37℃, 5％CO2, humidificado (para cultivo) / 4℃ (para refrigeración). | |
| Recipientes compatibles con cargadores de recogida | Placa PCR de 96 pocillos (0,1mL, 0,2mL) Placa de cultivo multipocillo (96 pocillos) | |
| Precisión de posicionamiento del muestreo | Resolución designada axial XYZ: 0,1μm | |
| Funciones de imagen | Método de escaneado confocal | Disco confocal ancho dual Nipkow mejorado con microlente |
| Recipientes compatibles con el cargador de la incubadora | Cuando la célula de muestreo: φ35mm platos *1 Microplaca (6well, 24well, 96well) |
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| Al observar la célula: φ35mm platos *1 Microplaca (6well, 12well, 24well, 48well, 96well, 384well, 1536well) Vidrio deslizante *2 |
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| Longitud de onda del láser de excitación | 405, 488, 561, 640nm (Uniformizador instalado) | |
| Filtro de emisiones | Tamaño del filtro : φ25nm, Número máximo de ranuras : 10 (conmutación eléctrica), Velocidad de conmutación adyacente : 100mseg. | |
| Iluminación de transmisión | Campo claro, fuente LED | |
| Objetivo | Objetivo seco : 4x, 10x, 20x, 40x Objetivo de larga distancia:20x, 40x Tenga en cuenta que sólo el objetivo seco de 40x puede utilizarse para el muestreo de células. |
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| Enfoque Z | Motor eléctrico Z, resolución designada : 0,1μm. | |
| Escenario eléctrico | Resolución designada axial XYZ : 0,1μm | |
| Autoenfoque | Autoenfoque láser | |
| Cámara | Cámara sCMOS 2.000 x 2.000 píxeles Tamaño de píxel : 6,5 x 6,5μm | |
| Otros | Estación de trabajo especial | Estación de trabajo para muestreo, medición y análisis, pantalla de 24 pulgadas x2 |
| Software de medición | Funciones de medición (2D, 3D, Time-lapse, Map imaging), Visualización de datos de medición y muestreo, Funciones de generación de informes (datos de imagen, datos de vídeo), Muestreo de células enteras, Muestreo de componentes intracelulares | |
| Software de análisis | Funciones de análisis (3D, Tile, Label-free, Análisis de texturas, Deep Learning, Gating), Visor 3D, Funciones gráficas, Funciones de informes (Datos de imagen, Datos de vídeo, EC50, IC50, Factor Z'-). | |
| Dimensiones exteriores, Peso | Unidad principal : Anchura 1.217 x Profundidad 643 x Altura 595 mm, 145 kg Caja utilitaria : W275 x D432 x H298 mm, 18kg Mezclador de gas : W275 x D432 x H298 mm, 10kg Estación de trabajo especial : A172 x P471 x H414 mm, 14kg Pantalla: 531 x 500 x 166 mm, 5,6 kg |
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| Entorno operativo | Temperatura : 15 a 30℃ Humedad : 30 a 70％RH sin condensación |
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| Energía consumo | Unidad principal, caja de servicios y mezclador de gas : 1.200VAmax Estación de trabajo : 950VAmax Pantalla : 42VAmax x 2 |
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| Formatos de datos (software de medición) | Imágenes capturadas : 16bit TIFF (OME-TIFF, TIFF) Datos de imagen de salida : TIFF, PNG, JPEG Datos de vídeo de salida : WMV, MPEG4 |
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Formatos de datos (software de análisis) |
Datos numéricos : CSV Datos de imagen de salida : TIFF, PNG, JPEG Datos de vídeo de salida : WMV, MPEG4 |
*1 Se requiere un portamuestras, y con él se pueden instalar hasta 3 muestras.
*2 Se requiere un portamuestras, y con él se pueden instalar hasta 4 muestras.
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Recursos
En los últimos años, la investigación en células individuales se ha hecho cada vez más popular, pero con técnicas analíticas más sensibles ha sido posible analizar componentes intracelulares específicos, como los orgánulos, a nivel unicelular.
El SS2000 es un sistema innovador que puede muestrear componentes intracelulares a nivel unicelular utilizando una punta (capilar de vidrio) con un diámetro de varios micrómetros mientras se obtienen imágenes con un microscopio confocal. En esta nota de aplicación, presentamos un caso en el que se tomaron muestras de componentes intracelulares con el SS2000 y se realizó un análisis genético mediante qPCR.
Noticias
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Nota de Prensa nov 30, 2021 Yokogawa Desarrollan el sistema unicelular SS2000 para muestreo subcelular
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Noticias Breves abr 25, 2024 Yokogawa Helps to Revolutionize the Field of Single-Cell Lipidomics
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