Disco giratorio confocal CSU

Tecnología confocal de doble disco giratorio

Como pionero en la tecnología confocal de doble disco giratorio, Yokogawa ha revolucionado la obtención de imágenes de células vivas en microscopía óptica. El método de barrido multihaz no solo ofrece imágenes a alta velocidad, sino que también reduce significativamente la fototoxicidad y el fotoblanqueamiento, lo que convierte a nuestros escáneres confocales en la herramienta estándar de facto para la obtención de imágenes de células vivas.

Imágenes de alta velocidad y resolución

Los escáneres confocales de Yokogawa emplean tecnologías de imagen avanzadas para ayudar a los investigadores a obtener imágenes de alta velocidad y alta resolución de células vivas.

  • Imágenes confocales rápidas en lapsos de tiempo de células vivas
  • Fototoxicidad mínima y menor fotoblanqueo
  • Capacidad de obtención de imágenes de fluorescencia confocal de células vivas
  • Estabilidad durante la obtención de imágenes a largo plazo y a alta velocidad
  • Facilita el análisis cuantitativo de enormes cantidades de datos

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Comparación de las series CSU

Modelo CSU-W1 CSU-X1
Gama alta Básico
Velocidad de imagen
(Máx. fps)
200 2,000 360
Motor del escáner
Velocidad de rotación
(rpm)
1,500-4,000 1,500-10,000
(Variable)
1,800
(Fijo)*2
Recomendado
cámara
tiempo de exposición
5mseg 0,5 ms 33mseg
FOV efectivo 17x16mm 10x7mm
Unidad de disco Seleccionable hasta
2 discos
Tamaño del agujero: 50µm, 25µm
1 disco
Tamaño del agujero :50µm
Rotación
disparador de posición
señal
Posibilidad de salida de señal externa Ninguno*2
Filtros EX Opción
DM Opción (hasta 3 filtros) Opción
(1 filtro)
EM Opción
(hasta 10 filtros con
rueda de filtros)
Opción
(hasta 12 filtros con
rueda de filtros)
Opción
(1 filtro)
Adición o
cambio de
filtros
En las instalaciones del usuario: bloque DM y filtros (EX, EM.)
En la fábrica Yokogawa:DM
*1 opción

Comparación entre el CSU y otros sistemas confocales

Modelo CSU Convencional
Confocal de barrido puntual
Convencional
Confocal de hendidura
Otros discos
disco Confocal
Epi- fluorescencia
(campo amplio)
Tipo de exploración Microlente mejorada
exploración multihaz
Exploración monohaz Exploración de líneas Exploración de disco (multihaz o de rendija) Ninguno
Fuente de luz Láseres Lámpara de arco de Hg o xenón
Detector CCD, EMCCD PMT Línea CCD CCD, EMCCD
Microscopio Flexible Específico Flexible / Específico Flexible
Velocidad de escaneado de
imagen a tamaño completo
2000 fps ~1fps ~120fps (512X512) <200fps Cualquier
Fotoblanqueo/
foto toxicidad
Bajo Grave Bajo
Confocalidad Alta (confocal X-Y-Z) Modesto
(Compromiso
y-resolución)
Modesto
(X-Y-Z confocal con agujero de alfiler,
Resolución y comprometida
con slit-scan)
Ninguno
Calidad de imagen
(Fondo)
Alta Buena S/N
(Bajo fondo)
Alta
(es necesario
necesario)
Modesto Modesto
(Fondo alto
con muestras tenues)
Bajo
(Fondo alto)

Laboratorios de usuarios

  • Laboratorio Ted Salmon, Departamento de Biología, Universidad de Carolina del Norte, Chapel Hill
  • Laboratorio Waterman-Storer, Laboratorio de Morfodinámica Celular y Tisular (LCTM),NHLBI(Bethesda Campus).
  • Laboratorio Tim Mitchison, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina de Harvard
  • Laboratorio Scholey, Dpto. de Biología Celular y Computacional, Universidad de California, Davis
  • Laboratorio Vale, Departamento de Farmacología Celular y Molecular, Universidad de California, San Francisco
  • Laboratorio Wadsworth, Departamento de Biología, Universidad de Massachusetts, Amherst
  • Laboratorio Kiehart, Departamento de Biología, Universidad de Duke
  • HSC Core Facilities Facultad de Medicina, Universidad de Utah
  • Centro de Microscopía Biológica de Indiana, Centro Médico de la Universidad de Indiana
  • Laboratorio Ehlers - Departamento de Neurobiología, Universidad de Duke
  • Laboratorio Bob Goldstein, Universidad de Carolina del Norte Chapel Hill
  • Laboratorio Andrew Matus, en el Instituto Friedrich Miescher de Investigación Biomédica
  • Laboratorio de Dinámica del Desarrollo, Escuela Superior de Ciencias de la Vida, Universidad de Tohoku
  • Laboratorio Zena Werb, Anatomía, Universidad de California San Francisco
  • Laboratorio Satoshi Nishimura, Departamento de Medicina Cardiovascular, Universidad de Tokio
  • Laboratorio Oshima, Escuela Superior de Estudios Interdisciplinarios de la Información, Universidad de Tokio.
  • El grupo de investigación Huser de UC Davis
  • Laboratorio Nakano, Escuela Superior de Ciencias, Universidad de Tokio

Sitios útiles

1) Microscopía e imagen Recursos en la WWW

Lista completa de todos los aspectos de microscopía e imagen, por Douglas W. Cromey Del Cellular Imaging Core of Southwest Environmental Health Sciences Center, University of Arizona Facultad de Farmacia, Universidad de Arizona.

 

2) El Centro de Biología Molecular "Severo Ochoa" (CBMSO)

Contiene enlaces a información general, laboratorios de microscopía, publicaciones, cursos y reuniones, sociedades, imágenes. Especialmente útil para encontrar talleres de microscopía.

 

3) La Instalación de Imágenes Celulares, que forma parte del Departamento de Instalaciones Básicas de Investigación del Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Utah.

Buena explicación del sistema confocal de barrido CSU-Disk por Chris Rodesch

 

4) Página web de Molecular Expressions

Gestionado por el Laboratorio Nacional de Altos Campos Magnéticos de la Universidad Estatal de Florida.
Una de las mayores colecciones de Internet de excelentes imágenes de microscopía óptica, e información bastante completa sobre todos los tipos de microscopía.
Java interactivo Tutoriales patrocinado por Nikon (Nikon MicroscopyU) y Olympus (Olympus Microscopy Resource Center) es extremadamente útil para aprender no sólo confocal sino todo tipo de microscopías y tecnologías relacionadas.

 

Ciencia de la vida Libros de texto

Técnicas de Microscopía, Avances en Ingeniería Bioquímica/Biotecnología Vol.95
Editor de serie T. Scheper, Editor de volumen J. Rietdorf, Springer(2005)
ISBN-10 3-540-23698-8

Microscopía confocal para biólogos
Editado por Alan R.Hibbs,Kluwer Academic / Plenum Publishers(2004)
ISBN:0-306-48468-4(hardback) 0-306-48565-6(e-Book)

Live Cell Imaging, A Laboratory Manual
Edited by Robert D. Goldman & David L. Spector. 2nd Edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press (2010)
ISBN:0-87969-893-4(pbk), ISBN 0-87969-892-6 (hardcover)

Manual de microscopía confocal biológica, 3ª edición
Editado por James B. Pawley, Springer(2006)

VideoMicroscopía, Los Fundamentos
Shinya Inoue, Kenneth Spring, Segunda edición Plenum Press. Nueva York,(1997)

ISBN: 0-306-45531-5

Escáner confocal de alta velocidad y visión directa: El CSU-10, Capítulo 2: Aplicaciones biológicas celulares de la microscopía confocal (Methods in Cell Biology)
Shinya Inoue y Ted Inoue
Editado por Brian Matsumoto Academic Press
ISBN:0-12-580445-8 ; 2ª Rev (2002/12)

Artículos: Tecnología CSU y sus aplicaciones

Cuantificación y agrupación de estructuras citoesqueléticas de actina en células vegetales: papel del agrupamiento de actina en el movimiento estomático durante los ciclos diurnos en las células de guarda de Arabidopsis.
Higaki T, Kutsuna N, Sano T, Kondo N, Hasezawa S
presentado.
Aplicación actual y tecnología de las imágenes de calcio de las multineuronas funcionales.
Shigehiro Namiki y Yuji Ikegaya
Boletín Biológico y Farmacéutico Vol.32(2009) , No.11
Imágenes en directo de la maduración cisternal del Golgi de la levadura.
Kumi Matsuura-Tokita, Masaki Takeuchi, Akira Ichihara, Kenta Mikuriya y Akihiko Nakano
Nature 441, 1007-1010 (22 de junio de 2006)
Comparación del rendimiento entre el sistema confocal de disco giratorio de alta velocidad Yokogawa y los sistemas confocales de barrido de un solo punto.
E. Wang, C. M. Babbey & K. W. Dunn
Journal of Microscopy, Vol. 218, Pt 2 Mayo 2005, pp. 148 ?159
Imágenes de vida de fluorescencia seccionadas ópticamente utilizando un microscopio de disco Nipkow y una fuente de excitación continua ultrarrápida sintonizable.
D.M.Grant, D.S. Elson, D.Schimpf, C.Dunsby, J.Requejo-Isidro, E.Auksorius, I.Munro, M.A. A. Neil, P. M. W. French ,E. Nye G. Stamp, P.Courtney
Optics Letters Vol. 30, No. 24 (2005 ) 3353
Optimización de la Microscopía Confocal de Disco Giratorio: Sincronización con el EMCCD ultrasensible.
F.K.Chong, C.G.Coates, D.J.Denvir, N.McHale, K.Thornbury & M.Hollywood
Actas del SPIE 2004
Spinning disk confocal microscope system for rapid high-resolution, multimode, fluorescence speckle microscopy and green fluorescent protein imaging in living cells.
Maddox PS, Moree B, Canman JC, Salmon ED
Methods Enzymol. 360:597-617 (2003)
Un sistema de microscopio confocal multiespectral de disco giratorio de alta velocidad para microscopía de moteado fluorescente de células vivas.
Adams, M.C., Salmon, W.C., Gupton, S.L., Cohan, C.S., Wittmann, T., Prigozhina, N. & Waterman-Storer, C.M
Métodos, 29, 29?41 (2003)
Microscopía confocal de disco giratorio: una herramienta de vanguardia para la obtención de imágenes del tráfico de membranas.
Nakano, A.
Cell Structure Function, 27, 349?355.(2002)
Microscopio confocal de barrido de alta velocidad de 1 fotograma/ms con microlente y discos de Nipkow.
T.Tanaami, S.Otsuki,N.Tomosada, Y.Kosugi. M.Shimizu & H.Ishida
Applied Optics, Vol.41,No.22(2002)
Nuevos modos de obtención de imágenes para microscopios de barrido en tándem con baterías de lentes.
T. F. Watson, R. Juskaitis & T. Wilson
Journal of Microscopy, Vol. 205, Pt 2 Febrero (2002) 209?212
Microscopía confocal de fluorescencia de alta velocidad utilizando un escáner Nipkow con microlentes para la obtención de imágenes tridimensionales de una única molécula de fluorescencia en tiempo real.
A.Ichihara, T.Tanaami, K.Isozaki, Y.Sugiyama, Y.Kosugi, K.Mikuriya, M.Abe e I.Uemura
Bioimágenes 4, 57-62(1996)

Artículos: Biología celular

(Transporte vesicular, dinámica de la actina, dinámica de los microtúbulos, división celular)

Obtención de imágenes de células vivas en seis dimensiones a largo plazo para el embrión de preimplantación de ratón que no afecta al desarrollo a término.
Yamagata, K., Suetsugu, R. y Wakayama, T., J. Reprod. Dev., 55: 328-331(2009) "
El DDX-23 de Caenorhabditis elegans, un homólogo del factor de empalme PRP28 de la levadura, es necesario para el cambio espermatozoide-oocito y la diferenciación de varios tipos celulares.
Konishi, T., Uodome, N., y Sugimoto, A.,Developmental Dynamics 237, 2367-2377(2008)
Determinación de la posición del plano de división celular.
J. C. Canman, L. A. Cameron, P.S. Maddox, A. Straight, J, S. Tirnauer, T. J. Mitchison, G. Fang., T. M. Kapoor & E. D. Salmon, Nature 424, 1074-1078 (28 de agosto de 2003) "Portada"
Los Microtúbulos Estabilizados con Taxol Pueden Posicionar el Surco Citocinético en Células de Mamífero.
Katie B. Shannon, Julie C. Canman,C. Ben Moree,Jennifer S. Tirnauer, y E. D. Salmon, Mol Biol Cell. Septiembre; 16(9): 4423?4436 (2005)
Dos quinesinas mitóticas cooperan para impulsar la separación de las cromátidas hermanas durante la anafase.
G. C. Rogers, S. L. Rogers, T. A. Schwimmer,S. C. Ems-McClung, .C E. Walczak, R. D. Vale, J. M. Scholey & D. J. Sharp, Nature 427(6972):, 364-370 (2004)
Crm1 es un efector mitótico de Ran-GTP en células somáticas
Arnaoutov, A., Azuma, Y., Ribbeck, K., Joseph, J., Boyarchuk, Y. y Dasso, M, Nat Cell Biol. Jun;7(6):626-32 (2005).
Nuclear congression is driven by cytoplasmic microtubule plus end interactions in S. cerevisiae.
J.N. Molk, E.D. Salmon, y K. Bloom, JCB, Vol. 172, Número 1, 27-39 (2006)
Los fragmentos del centrosoma y los microtúbulos son transportados asimétricamente lejos del plano de división en anafase
Nasser M. Rusan y Patricia Wadsworth ,JCB 168 (1) 21?28 (2005)
Las funciones de las proteínas motoras basadas en microtúbulos en la mitosis: análisis exhaustivo de ARNi en la línea celular S2 de Drosophila.
G. Goshima y R.D. Vale,JCB 162(6) 1003?1016 (2003)
La orientación del huso en Saccharomyces cerevisiae depende del transporte de los extremos de los microtúbulos a lo largo de cables de actina polarizados.
Hwang, E., Kusch, J., Barral, Y. & Huffaker, T.C, J. Cell Biol. 161, 483?488 (2003)
Migración celular sin lamelipodio : traducción de la dinámica de la actina en movimiento celular mediado por tropomiosina
S.L. Gupton, K.L. Anderson, T. P. Kole, R.S. Fischer, A. Ponti, S.E. Hitchcock-DeGregori, G. Danuser, V.M. Fowler, D.Wirtz, D. Hanein y C.M. Waterman-Storer ,JCB 168(4) 619-631(2005)
Dinámica de la actina en el anillo contráctil durante la citocinesis en la levadura de fisión.
Pelham, R.J. & Chang, F, Nature, 419, 82?86. (2002)
Las células T efectoras CD8+ contribuyen al reclutamiento de macrófagos y a la inflamación del tejido adiposo en la obesidad.
Nishimura S, Manabe I, Nagasaki M, Eto K, Yamashita H, Ohsugi M, Otsu M, Hara K, Sugiura S,Yoshimura K, Kadowaki T, Nagai R, Nature Medicine 8, 914- 920 (15 de agosto de 2009).
La captación de células dendríticas por células T reorganiza rápidamente el transporte de MHC de clase II.
M. Boes, J. Cerny, R. Masso, M. Op den Brouw, T. Kirchhausen, J. Chenk & H. L. Ploegh, Nature 418, 983- 988 (29 de agosto de 2002) "Portada"
Coordinación funcional de los motores de transporte intraflagelar.
G. Ou, O.E. Blacque, J.J.Snow, M.R. Leroux & J.M. Scholey,Nature 436(7050):583-7. (2005).
Análisis tridimensional de la exocitosis del transportador post-Golgi en células epiteliales
Kreitzer, G., Schmoranzer, J., Low, S.H., Li, X., Gan, Y., Weimbs, T., Simon, S.M. & Rodriguez-Boulan, E, Nature Cell Biol. 5, 126?136. (2003)
Dinámica de las Estructuras Recubiertas de Clatrina de Membrana Durante la Citocinesis.
James H. & Wang, Yu-Li Warner, Anne K., Keen, Traffic 7 (2), 205-215. (2006 )

Artículos: Neurociencia

Orientación de la profilina inducida por la actividad y estabilización de la morfología de la espina dendrítica.
Ackermann, M., y A. Matus, Nat Neurosci. Nov;6(11):1194-200 (2003)
Dinámica y Regulación de Capas de Clatrina en Zonas Endocíticas Especializadas de Dendritas y Espinas.
T.A. Blanpied, D.B. Scott, M.D. Ehlers, Neuron, Vol. 36, 435?449, 24 de octubre(2002)
El Complejo Neurabin/Proteína Fosfatasa-1 Regula la Morfogénesis y Maduración de la Espina Dendrítica.
R.T.Terry-Lorenzo, D.W. Roadcap, T. Otsuka , T.A. Blanpied, P.L. Zamorano, C.C. Garner, S. Shenolikar, and M.D. Ehlers, MBC Vol. 16, Issue 5, 2349-2362, May (2005)
La fosfatidilinositol fosfato cinasa tipo I regula la dinámica de la fusión de vesículas de núcleo denso de gran tamaño.
L.W..Gong , G. D.Paolo, E. Diaz , G.Cestra , M-E. Diaz, M. Lindau , P.De Camilli , y D. Toomre , PNAS, vol. 102 nº 14 5204-5209 (2005)

Dinámica del calcio

Formación de ondas de Ca2+ planas y en espiral en miocitos cardíacos aislados.
Ishida, H., Genka, C., Hirota, Y., Nakazawa, H. & Barry, W.H, Biophys. J. 77, 2114?2122 (1999)
Imágenes simultáneas del metabolismo del fosfatidil inositol y los niveles de Ca2+ en células PC12h.
Morita,M,Yoshiki, F,and ,Kudo,Y, BBRC 308, 673-678 (2003)
Oscilaciones de calcio en las células intersticiales de la uretra del conejo.
Johnston, L., Sergeant, G. P., Hollywood, M. A., Thornbury, K. D. & McHale, N. G,The Journal of Physiology 565 (2), 449-461 (2005).

Flujo sanguíneo microvascular

Observación en tiempo real de los cambios hemodinámicos en aneurismas glomerulares inducidos por anticuerpos anti-Thy-1.
Oyanagi-Tanaka, Y., Yao, J., Wada, Y., Morioka, T., Suzuki, Y., Gejyo, F., Arakawa, M. & Oite, T, Kidney Int. 59, 252?259. (2001)
Imágenes in vivo en tiempo real de plaquetas, factor tisular y fibrina durante la formación de trombos arteriales en el ratón.
Shahrokh Falati, Prter Gross, Glenn Merrill-Skoloff, Barbara C. Furie & Bruce Furie, Nat Med 8 (10) 1175-1180(2002)

Otras aplicaciones

Evidencia de la generación de ROS por las mitocondrias en células con deterioro de la cadena de transporte de electrones y daño del ADN mitocondrial
Hiroko P. Indo,Mercy Davidson,Hsiu-Chuan Yen,Shigeaki Suenaga,Kazuo Tomita,Takeshi Nishii,Masahiro Higuchi,Yasutoshi Koga,Toshihiko Ozawa,Hideyuki J. Majima,Mitochondrion No.7 106?118(2007)

Recursos

Descripción General:

Descubrir los principios básicos de la vida mediante la imagen en vivo de C. elegans

Descripción General:

Visualización de las bases del comportamiento celular de la morfogénesis epitelial y la progresión del cáncer epitelial

Descripción General:

Spinning Disk Confocal Microscopy for Quantitative Imaging and Multi-Point Fluorescence Fluctuation Spectroscopy.

Nota de aplicación
Descripción General:

Ancho y Claro
Unidad de escáner confocal

Industrias:
Descripción General:

La observación a largo plazo de la mitosis mediante microscopía de células vivas es necesaria para descubrir el papel de la cohesina en la arquitectura nuclear compartimentada, que está vinculada a las funciones nucleares.
Para llevar a cabo la observación a largo plazo de la mitosis se necesitan dispositivos que tengan bajos efectos fototóxicos sobre las células vivas y permitan la obtención de imágenes a alta velocidad. Utilizando la unidad de escáner confocal CSU W-1 para la obtención de imágenes a intervalos de tiempo se puede examinar la entrada en mitosis, la progresión mitótica y la salida.

Descripción General:

Comparación entre CSU y LSM convencional en películas 4D.

Descripción General:

Para investigar la dinámica interactiva de las estructuras y orgánulos intracelulares en el movimiento estomático mediante la técnica de imagen en vivo, se utilizó un sistema CSU para capturar imágenes tridimensionales (XYZN) e imágenes time-laps (XYT) de células guardianas.

Descripción General:

Unidad de escáner confocal más rápida, brillante y versátil

Industrias:
Informe técnico de Yokogawa
2,2 MB
Publicación en los medios de comunicación
Descripción General:

Lista de publicaciones seleccionadas : CSU-X1

Publicación en los medios de comunicación
Descripción General:

Lista de publicaciones seleccionadas : CSU-W1

Descargas

Vídeos

Descripción General:

YOKOGAWA permite la obtención rápida de imágenes confocales en tiempo real para aplicaciones como la obtención de imágenes 3D de alta velocidad y de células vivas a largo plazo. Estos análisis cuantificables de imágenes son herramientas esenciales para el descubrimiento moderno de fármacos de precisión.
 

Descripción General:

YOKOGAWA contribuirá a la evolución tecnológica, sobre todo en herramientas de medición y análisis, para ayudar a construir un mundo en el que los investigadores se centren cada vez más en la interpretación perspicaz de los datos y en el avance de Ciencia de la vida en beneficio de la humanidad.

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