Sistema de alto rendimento CV8000

O software de análise de alto conteúdo CellPathfinder é atualizado.
A opção Deep Learning foi lançada.:Sobre o Deep Learning

O CV8000 apresenta uma incubadora de células com um design hermético aprimorado que facilita a observação do comportamento das células durante longos períodos de tempo. Além disso, o CV8000 vem com o CellPathfinder, um novo programa que pode analisar imagens de células não rotuladas e imagens 3D de amostras. Com esses recursos, o CV8000 aumenta a eficiência da pesquisa de descoberta de medicamentos e da pesquisa biomédica em assuntos de ponta, como células iPS e ES.

Destaques do sistema CV8000

Comprimento de onda do laser de excitação 405nm、445nm、488nm、561nm、640nm
Fonte de iluminação Laser
Lente objetiva 2x a 60x
(Seco, Contraste de fase, Imersão em água, Longa distância de trabalho)
Câmera Câmera sCMOS de alta sensibilidade (até 4 unidades)
Autofoco Modo baseado em laser, modo baseado em imagem
Software CellPathfinder、CellLibrarian

 

Introdução

Vale da morte

No mercado de desenvolvimento de medicamentos, as demandas por sistemas de análise de alto conteúdo para avaliação da eficácia de medicamentos estão aumentando de acordo com as necessidades de ensaios baseados em células e triagem fenotípica. Para aumentar a eficiência da triagem, são necessários dispositivos com velocidades mais altas (maior rendimento).
Por outro lado, para superar o "vale da morte" do processo de desenvolvimento de medicamentos, a qualidade dos resultados da triagem deve ser aumentada.
Isso exige a construção de sistemas de avaliação mais complexos que utilizem parâmetros multifacetados por meio de sistemas de cultivo em 3D, imagens de células vivas e análise de imagens com mais detalhes.
Na pesquisa atual de desenvolvimento de medicamentos, determinar como implementar a triagem de rendimento e a triagem de sistemas de avaliação complexos em paralelo é uma questão importante.

Solução

O CellVoyager CV8000 é um sistema de análise de alto conteúdo de última geração que resolve esse desafio contraditório de triagem.
Por meio da combinação de um scanner confocal de alta velocidade proprietário Yokogawa, lentes de imersão em água, até quatro câmeras de alto campo de visão, um estágio microscópico com ambiente de cultivo de células e um pipetador robótico integrado, realizamos não apenas imagens de alta resolução e alto rendimento, mas também triagem fenotípica por meio de um sistema de avaliação mais complexo.
Além disso, nosso software de análise especializado, o CellPathfinder, usa aprendizagem profunda e aprendizado de máquina para reconhecer objetos-alvo com alta precisão, oferecendo suporte desde a análise de imagens até a exibição de resultados por meio de gráficos.

A vantagem do Yokogawa

  • Unidade de scanner confocal
  • Compatível com experimentos ao vivo/cinéticos
  • Alto rendimento
  • Tecnologia confiável e comprovada

Viagem a mundos desconhecidos

Imagem confocal em tempo real, sem rótulo

Imagem de ciclo de vida de longo prazo

Imagens de células vivas de longo prazo

Incubadora de estágio incluída como padrão. Realização de observação ininterrupta e de longa duração (3 dias ou mais) por meio de umidade, temperatura e CO 2 controle.

Esquerda:Antes da incubação Direita:Após 68 horas de incubação

Ensaio cinético

Ensaio cinético

A adição de medicamentos durante a geração de imagens é possível graças a um pipetador robótico integrado com pontas descartáveis.
Ideal para experimentos cinéticos que envolvem a observação de fenômenos de alta velocidade.

Esquerda:Antes da incubação Direita:Após a estimulação

Organoide / Esferoide

Organoide / Esferoide

Yokogawa A tecnologia confocal de disco giratório da Sonic é excelente na geração de imagens de amostras com profundidade, como amostras de cultura 3D, em que é difícil obter imagens claras e rápidas, permitindo uma avaliação próxima da qualidade in vivo.

Esquerda:Imagem original Direita:Imagem de reconhecimento

Análise sem rótulos

Análise sem rótulos

O reconhecimento e a análise podem ser realizados tirando imagens de campo brilhante de várias posições Z e criando uma imagem de campo brilhante CE usando o software de análise CellPathfinder incluído. A precisão da análise é aprimorada ainda mais com a nova opção Deep Learning.

Esquerda: campo brilhante do CE Direita: imagem de reconhecimento de células

Detalhes

Tecnologia de última geração que permite que você faça o que quiser

Observe as células como elas são -Sistema confocal de disco giratório duplo

Sistema confocal de disco giratório duplo

Um método de varredura múltipla de propriedade da Yokogawa que utiliza aproximadamente 1.000 feixes de laser na região de observação e discos em tandem girando em alta velocidade. Os discos compreendem um disco de matriz de orifícios com aproximadamente 20.000 orifícios dispostos em um padrão espiral de passo igual e um disco de matriz de microlentes que focaliza o laser de luz de excitação em orifícios individuais. Isso não apenas permite a geração de imagens em alta velocidade, mas também evita em grande parte a fototoxicidade e a fotobranqueamento da fluorescência.

Observação mais profunda e clara -Trocador de disco pinhole-

Trocador de disco pinhole
 
Trocador de disco pinhole

Dois tipos diferentes de discos pinhole (25/50μm) podem ser usados, de acordo com a amostra. Para amostras espessas, a redução do diâmetro do pinhole permite maior confocalidade e imagens mais nítidas. Para amostras escuras, o aumento do diâmetro do pinhole permite imagens mais brilhantes.

Exemplo de geração de imagens de organoides Orifício superior: 25 μm Orifício inferior: 50 μm

Triagem de maior rendimento -Configuração óptica-

Configuração óptica

A configuração do sistema óptico pode ser selecionada de acordo com a finalidade. Uma única placa de 96 poços pode ser fotografada em quatro cores em um minuto com a conexão de quatro câmeras sCMOS de campo amplo de alta sensibilidade. O sistema também é compatível com o ensaio FRET e CellPainting.

Captura de estruturas mais finas -Lente original de imersão em água-

lentes de imersão em água

As lentes de imersão em água são excelentes na captura de imagens de alta resolução de células em um líquido. O CV8000 pode ser equipado com uma lente objetiva de imersão em água de 40x ou 60x. Nossa lente de 40x é uma lente particularmente exclusiva, capaz de correção de aberração esférica altamente avançada, permitindo a captura de imagens brilhantes de alta resolução em um campo totalmente amplo. O fornecimento de água para as lentes também é totalmente automatizado. Esse equipamento possibilita a triagem de alto rendimento por meio de lentes de submersão em água.

Captura do movimento de células vivas - Incubadora de alta precisão e pipetador robótico

robô pipetador

A incubadora de estágio apresenta uma construção hermética, gerenciando a umidade, a temperatura e o CO 2 níveis. O pipetador robótico integrado conduz o seguinte processo de forma totalmente automática: coleta da ponta → coleta do reagente da placa de reagente → adição do reagente à placa de amostra → descarte da ponta. Além de as imagens poderem ser obtidas rapidamente antes e depois da instilação do reagente, também é possível adicionar reagentes a poços individuais várias vezes e ajustar a velocidade de adição etc., ampliando a faixa de observação dinâmica por meio da instilação do reagente.

Um sistema de HCA total mais favorável às células vivas

Possibilitando a geração de imagens de células vivas de longa duração - Com uma mesa de incubadora de estágio integrada

As células HeLa foram semeadas em uma placa de 96 poços a uma densidade de 500 células por poço e cultivadas por 24 horas. A placa de poços foi então colocada na incubadora de estágio interno e a cultura de células foi conduzida por 72 horas, e a área total (doravante denominada Área Total) ocupada pelas células foi analisada. Como resultado, foi observada uma irregularidade mínima na multiplicação de células nos 96 poços (excluindo os quatro poços dos cantos) em comparação com uma incubadora de CO2 comum.

Comparação da multiplicação celular com a incubadora regular <sub>de CO2</sub> após 72 horas de incubação

Comparação da multiplicação de células com o CO 2 incubadora após 72 horas de incubação(n=3)

  • 96 média do poço: 90
  • Média dos 36 poços mais externos: 81
  • Média de 60 poços (excluindo o mais externo): 96

Os valores representam o seguinte: Área total do CV8000 após 72 horas / Área total às 0 horas (doravante denominada razão da área total) / razão da área total da incubadora de CO2 x 100.
(Números próximos a 100 significam que a multiplicação de células foi aproximadamente igual para o CV8000 e a incubadora de CO2).
Foi verificada uma multiplicação de células próxima à da incubadora de CO2, excluindo os quatro poços de canto.

Curvas de multiplicação de células para cada poço de uma placa de 96 poços

Curvas de multiplicação de células para cada poço de uma placa de 96 poços

  • Eixo vertical: Área total
  • Eixo horizontal: Tempo (0-72 horas)

A multiplicação celular foi baixa nos quatro poços de canto; no entanto, ela continuou nos outros poços.

Proporção de área total após o início do cultivo

Proporção de área total após o início do cultivo (24, 48 e 72 horas) (n=3)

Excluindo os quatro poços de canto, mesmo após 72 horas, não houve grandes diferenças na multiplicação de células.
A baixa variação na velocidade de multiplicação celular entre os poços pode ser observada 24 horas 48 horas 72 horas.

More info Evaluation of cell-culture condition in CV8000’s internal stage incubator

Integração de sistemas

Gerenciamento centralizado de processos, desde o ambiente de cultivo até a transferência, geração de imagens, análise e gerenciamento de dados.
Oferecemos sistemas otimizados em resposta às necessidades de nossos clientes.

Integração de sistemas

Software de análise de alto conteúdo CellPathfinder

O software analisa os dados de imagem capturados com o CV8000, cria gráficos e exporta vários dados. Usuários iniciantes e experientes podem tirar o máximo proveito do software, graças à abundância de modelos e à capacidade flexível de edição de protocolos. As funcionalidades de campo brilhante CE e de aprendizado de máquina possibilitam a análise do site sem rótulo. A nova opção Deep Learning também foi adicionada, melhorando consideravelmente a precisão do reconhecimento de células.

More info High Content Analysis Software CellPathfinder

Basta clicar no item de menu para análise

Basta clicar no item de menu para análise

Basta seguir o fluxo exibido na parte superior da tela. O menu de análise tem ícones fáceis de entender. Basta clicar no item de menu desejado e o protocolo será carregado.

Resultados rápidos para verificação e estudo imediatos

Resultados rápidos para verificação e estudo imediatos

Os dados numéricos computados podem ser exibidos de várias maneiras. Os gráficos e as imagens de células são vinculados, facilitando a verificação e a consulta dos resultados.

Avaliação imparcial do fenótipo por meio de IA

Avaliação imparcial do fenótipo por meio de IA

O aprendizado de máquina também oferece digitalização sem viés de experimentos avaliados visualmente. O reconhecimento automático é possível simplesmente clicando na forma que você deseja que o software aprenda.

Análise de fenótipo sem rótulos

Análise de fenótipo sem rótulos

Elimina o tempo, o custo e a influência sobre as células associados à rotulagem de células. Uma classificação de precisão ainda maior é possível por meio da combinação com a aprendizagem profunda.

Especificações

Sistema de descoberta citológica de alto rendimento

Modelo CV8000
Formato de amostra Placa de poços múltiplos (6, 12, 24, 48, 96, 384, 1536 poços), lâmina de vidro
Modo de imagem Modo confocal: máx. Registro simultâneo de 4 cores
Campo brilhante/contraste de fase (10x, 20x para placas de 6, 12, 24 poços), contraste de fase digital (10x, 20x)
Formato de dados de saída Dados da imagem: TIFF de 16 bits, PNG
Dados numéricos: CSV, formato original
Comprimento de onda de excitação 405/445/488/561/640 nm, todos os lasers sólidos, máx. 5 lasers
【Opção】 LED de 365 nm
Iluminação de luz branca LED
Autofoco Modo baseado em laser, modo baseado em imagem
Objetivos Máx. Estão disponíveis 6 lentes, que podem ser trocadas automaticamente
Seco: 2x, 4x, 10x, 20x, 40x Imersão em água: 20x, 40x, 60x
Contraste de alta qualidade: 10x, 20x Longa distância de trabalho: 20x
Unidade confocal Scanner confocal de disco duplo de Nipkow com visão ampla aprimorada por microlente, pinhole de 50 μm
【Opção】 Disco de pinhole de 25 μm e trocador automático de disco de pinhole
Câmera sCMOS (pixels efetivos: 2000X2000, tamanho do pixel: 6,5 μm), máximo. 4 câmeras
Incubadora de estágio Temperatura para incubação: 35-40 ℃ Caixa de fornecimento de CO2 (CO2: 5%, umidificação forçada)

Robô pipetador

【Opção】 Tipo de ponta descartável (tipo 96 pontas ou 384 pontas)
Leitor de código de barras 【Opção】 1 ou 2 dimensões
Estações de trabalho Estação de trabalho com dois monitores para controle do sistema, estação de trabalho com dois monitores para análise de dados
Software de análise Software de análise de alto conteúdo CellPathfinder
Granularidade, Neurite, Morfologia nuclear, Translocação nuclear, Translocação da membrana plasmática, Aprendizado de máquina, Análise sem rótulos, Análise 3D, Aprendizado profundo, etc.
Ambiente operacional 15~30℃ 30~70%RH (sem condensação)
Energia fornecimento Unidade de medição: AC100-240V, 50/60Hz, 2KVA máx.
Estação de trabalho para controle do sistema:AC100-240V, 50/60Hz, 1,3KVA máx.
Estação de trabalho para análise de dados:AC100-240V, 50/60Hz, 950VA máx.
Dimensões Unidade de medida: L1.280×D895×H1.450 mm
Peso Unidade de medida: 510Kg

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Recursos

Overview:

O software de análise de translocação nuclear CV8000 permite a análise de alterações na localização de moléculas de sinal que se transferem entre o citoplasma e o núcleo, como as proteínas. A seguir, um exemplo da análise de translocação do NFκB, um fator de transcrição.

Nota de aplicação
Nota de aplicação
Overview:

O indicador de ciclo celular baseado em ubiquitinação fluorescente (Fucci) é um conjunto de sondas fluorescentes que permite a visualização da progressão do ciclo celular em células vivas.

Industries:
Yokogawa Relatório Técnico
1,2 MB
Yokogawa Relatório Técnico
O mundo visto das células
(rd-te-r06002-001)
2.2 MB
Overview:

Lista de publicações selecionadas : CV8000, CV7000, CV6000

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Resumo do Produto
Overview:

O CV8000 apresenta uma incubadora de células com um design hermético aprimorado que facilita a observação do comportamento das células durante longos períodos de tempo. Além disso, o CV8000 vem com o CellPathfinder, um novo programa que pode analisar imagens de células não rotuladas e imagens 3D de amostras. Com esses recursos, o CV8000 aumenta a eficiência da pesquisa de descoberta de medicamentos e da pesquisa biomédica em assuntos de ponta, como células iPS e ES.

Overview:

YOKOGAWA contribuirá para a evolução tecnológica, especialmente em ferramentas de medição e análise, para ajudar a construir um mundo onde os pesquisadores se concentrarão cada vez mais na interpretação perspicaz dos dados e no avanço do Life Science para beneficiar a humanidade.

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