Entrega em nanopontos / Amostragem em nanopontos SU10

A Single Cellome Unit SU10 permite o fornecimento de substâncias, como ferramentas de edição de genoma, diretamente no citoplasma ou no núcleo de células individuais visadas.
Para uso com um microscópio óptico invertido. O microscópio não está incluído com a SU10.

Vantagens do SU10

- Direcionamento para uma única célula com entrega direta no núcleo ou no citoplasma.
- Danos mínimos às células.
- Automatizado, de alta velocidade e com alta taxa de sucesso.

Detalhes

Injetor nano-ponto automatizado para célula única: SU10

 

Direcionamento para uma única célula com entrega direta no núcleo ou no citoplasma

  • Selecione as células a serem entregues enquanto as observa em um microscópio e entregue as substâncias no núcleo ou no citoplasma das células-alvo.
  • Controle fácil da posição XY e controle automático da posição Z de entrega no software.

 

SU10 entrega direta

A solução de dextrana marcada com FITC (peso molecular de 70.000) foi administrada em células HeLa.

 

Danos mínimos às células

  • A nanopipeta é uma pipeta de vidro com diâmetro externo mínimo da ponta de várias dezenas de nanômetros, minimizando os danos às células.
  • A entrega com alta viabilidade celular permite a análise de uma única célula ao vivo.

Ponta SU10 da nanopipeta

A ponta da nanopipeta em um microscópio eletrônico.

SU10 danifica menos

 

Automatizado, de alta velocidade e com alta taxa de sucesso

  • O SU10 usa detecção automatizada da superfície celular, inserção e entrega à célula. O processo leva aproximadamente 10 segundos, com uma taxa de sucesso de 90%. (Experimento realizado em Yokogawa)
  • As operações anteriormente realizadas manualmente por pesquisadores experientes são muito mais fáceis de gerenciar com o SU10.

Processo de entrega de nano SU10

Webinar: Tecnologia de nanopipeta - uma nova ferramenta para análise de célula única

Nosso foco principal é a introdução de um novo Plataforma de manipulação de célula única (SU-10) usando uma nanopipeta para injeção de uma única célula em células vivas. Essa tecnologia recém-desenvolvida posiciona sua nanopipeta com precisão em nanoescala, permitindo a injeção e/ou aspiração de quantidades mínimas de material dentro e fora de células individuais sem afetar a viabilidade celular. Além disso, apresentaremos a nossa estratégia para desenvolver esse novo produto para aômica de célula única e como essa tecnologia de nanopipeta pode analisar vários analitos, incluindo DNA, RNA, proteínas e outras moléculas pequenas em pesquisa básica ou descoberta de medicamentos.

Assista gratuitamente ao nosso webinar sobre a tecnologia de nanopipetas. Registre-se aqui

Exemplos de células que podem ser direcionadas

  • Linha celular (HeLa, HEK293, CHO, MDCK, HepG2, etc.)
  • Cultura de células primárias (neurônio, hepatócito, etc.)
  • Linhas de células-tronco (células iPS, células ES, etc.)
  • Linhas de células imunológicas (células T, células Ba/F3, etc.)
  • Célula vegetal com parede celular

 

Exemplos de materiais que podem ser injetados

  • CRISPR-Cas9 (Cas9 RNP)
  • Proteína (anticorpo, GFP, etc.)
  • Ácido nucleico (DNA de fita simples, etc.)
  • Reagente fluorescente

 

Exemplo de aplicativo

Aplicação SU10

 

PERGUNTAS E RESPOSTAS

Q1. Qual é a diferença em relação a um sistema de microinjeção?

A1. O SU10 reduz os danos a uma célula com a nanopipeta porque o tamanho de sua ponta é menor que 1/10 de uma ponta usada para microinjeção.
A detecção automática da superfície da célula permite uma alta taxa de sucesso de inserção na profundidade pretendida de uma célula.
A operação de entrega usa um método elétrico em vez de pressão pneumática ou hidráulica.

 

Q2. Qual é a diferença em relação aos métodos tradicionais de transfecção (por exemplo, reagentes de transfecção, eletroporação)?

A2. O SU10 pode fornecer materiais para as células selecionadas.
O SU10 permite o fornecimento direto de reagentes no citoplasma ou no núcleo.

 

Q3. Qual é a diferença entre esse método e a eletroporação?

Além da "diferença em relação aos métodos tradicionais de transfecção" mencionada acima, devido à detecção automatizada da superfície celular, a suspensão das células não é necessária durante a injeção.

 

Q4. Qual é o volume máximo de injeção na célula?

A4: Estima-se que seja dezenas de femtolitros (fL) por segundo (1fL=1x10-15L).
O volume pode ser alterado pelas configurações do software.
* O volume de entrega pode variar de acordo com o soluto e o veículo.

 

Q5. A nanopipeta é descartável?

A5. Sim, mas uma nanopipeta pode entregar 50 células ou mais*.
* Experimento usando células HeLa por Yokogawa.

Especificação

Módulo do atuador Movimento grosseiro (atuador motorizado) Curso: Aprox. 50 mm/eixo (resolução de ajuste do eixo XYZ: 0,625 μm)
Movimento fino (atuador piezoelétrico) Curso: 100μm/eixo
(resolução de configuração do eixo XYZ: 10nm, na penetração e extração: 1nm)
Módulo de medição Faixa de geração de tensão -10V a +10V (resolução de configuração: 10mV)
Faixa de medição de corrente -900nA a +900nA (faixa de corrente de ajuste: ±9V)
Energia fornecimento Energia consumo (controlador principal + controlador Piezo) 100VA ou menos
Tensão de alimentação (controlador principal) 100 a 200V / 220 a 240VAC (não é necessário comutar)
Tensão de alimentação (controlador Piezo) 100 a 120V / 220 a 240VAC (o modelo deve ser especificado ao fazer um pedido)
Energia frequência de alimentação (controlador principal + controlador Piezo) 50/60Hz
Dimensões externas e peso Controlador principal 260(L) x 99(A) x 280(P) mm, aprox. 2,8 kg
Controlador piezoelétrico 236(L) x 88(A) x 273(P) mm, aprox. 4,6 kg
Módulo do atuador 270*(L) x 219(A) x 245*(P) mm, aprox. 2,2 kg
* Caso os eixos X e Y se movam na direção do tamanho máximo
Módulo de medição 85(L) x 30(A) x 43(P) mm, aprox. 0,1 kg
Joystick 100(L) x 145(A) x 144(P) mm, aprox. 0,3 kg
Proteção de segurança 130(L) x 230(A) x 287(P) mm, aprox. 0,7 kg
Diâmetro externo da ponta da nanopipeta (no caso do SU10ACC-NP01) Abaixo de 100nm (valor de referência)
Operação Meio ambiente 15 a 35℃, 20 a 70%RH Sem condensação, altitude de até 2000m
Compatibilidade do microscópio Para uso com um microscópio óptico invertido. * O microscópio não está incluído com o SU10.
Entre em contato com Yokogawa para instalar o SU10 em um microscópio invertido diferente.
Exemplos de instalação: Olympus IX71, Olympus IX83, Nikon Ti2

 

Recursos

Overview:

Esta nota de aplicação apresentará os recursos do SU10 e fornecerá exemplos que demonstram o fornecimento de ferramentas de edição de genoma (Cas9 RNP) usando a tecnologia.

Overview:

O SU10 é uma nova tecnologia que pode fornecer substâncias-alvo para as células (núcleo ou citoplasma) usando uma pipeta "nano" feita de capilar de vidro com um diâmetro de ponta externa de apenas dezenas de nanômetros.

Overview:

A SU10 é uma nova tecnologia que permite o fornecimento de substâncias-alvo diretamente nas células (núcleo ou citoplasma) usando uma pipeta "nano" feita de um capilar de vidro com um diâmetro de ponta externo de dezenas de nanômetros.

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YOKOGAWA contribuirá para a evolução tecnológica, especialmente em ferramentas de medição e análise, para ajudar a construir um mundo onde os pesquisadores se concentrarão cada vez mais na interpretação perspicaz dos dados e no avanço do Life Science para beneficiar a humanidade.

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