A ferramenta mais adequada para a geração de imagens de células vivas!
A corrente principal da pesquisa atual em ciências biológicas é a observação de vários processos vitais em amostras vivas em tempo real com um alto grau de sensibilidade e resolução, e com o mínimo de branqueamento e fototoxicidade. Com base em sua inovadora tecnologia de varredura de disco Nipkow aprimorada por microlentes, as unidades CSU da Yokogawa estão sendo usadas em todo o mundo como a ferramenta mais poderosa para a geração de imagens de células vivas.
Ampla aplicação: geração de imagens de reações biológicas rápidas em nível de milissegundos para geração de imagens de alta resolução de amostras estáticas
- Imagens de alta resolução com lapso de tempo de células vivas
- Aquisição de imagens em alta velocidade
- Reconstrução 3D
- Observação 3D em tempo real
- Observação dinâmica multicolorida
- Observação FRET de alta resolução e alta velocidade
Detalhes
Diferentemente dos sistemas confocais convencionais, a CSU usa câmeras CCD para capturar imagens confocais. Aproveitando o rápido avanço da capacidade da câmera CCD, é cada vez mais possível adquirir imagens de alta resolução em alta velocidade. Em especial, a redução significativa do branqueamento e da fototoxicidade com a CSU possibilita a geração de imagens de alterações delicadas em células vivas, como a divisão celular ou a diferenciação embrionária.
Observação da divisão celular em um embrião de drosófila
Imagens de lapso de tempo da divisão celular: (centrômero: marcado com EGFP)
By courtesy of Dr. J.Sholey , Dr. D.Sharp : University of California , Davis
A varredura de alta velocidade de até 1.000 quadros/s torna possível registrar reações em nível de milissegundos
Imagens de alta velocidade usando uma câmera CCD ultrarrápida com intensificador de imagem GenlV
Tempo decorrido desde a estimulação elétrica :
16ms 20ms 24ms 28ms
Alterações pós-eletrostímulo no Ca2+ em células do músculo cardíaco ventricular de camundongo marcadas com Fluo-3, imagens tiradas em intervalos de 4 ms
By courtesy of Dr. Hideyuki Ishida , Dept. of Physiology , School of Medicine , Tokai University (in Japanese)
Os dados de reconstrução em 3D de células vivas podem ser adquiridos com facilidade a partir de pilhas de imagens confocais nítidas capturadas por uma câmera CCD de alta resolução.
Imagens construídas em 3D do cromossomo salivar da drosófila (rotulado com PI) (óleo 60×)
By courtesy of Dr. Yoshihiro Akimoto , Second Dept. of Anatomy
,School of Medicine , Kyorin University
Em sincronização com o movimento rápido da lente objetiva usando o atuador piezoelétrico e uma câmera de alta velocidade, a CSU22 permite realizar a digitalização 3D de alta velocidade de 30 ou mais imagens de seção transversal por segundo.
Exemplo de aplicativo
Reconstrução 3D de objetos em movimento
Rastreamento em 3D do comportamento de C.elegans que expressam a proteína faríngea fundida com EGFP (as imagens em 3D foram reconstruídas após a aquisição de cada 30 imagens de seção transversal por segundo)
1 segundo
2 segundos
3 segundos
Imagem 3D em tempo real da transdução de sinal
Imagens confocais de seção única
0 seg
6 segundos
12 segundos
Projeção (sobreposição) de 30 imagens de seção transversal por segundo
Digitalização 3D de alta velocidade das reações de Ca2+ estimuladas pelo ácido glutâmico em células nervosas corticais cerebrais marcadas com Fluo-3
By courtesy of Dr. Atsuo Fukuda , Dept. of Physiology ,Hamamatsu University School of Medicine.
A CSU pode gerar imagens confocais em cores reais e, portanto, pode utilizar uma câmera colorida 3CCD altamente sensível, que permite a geração simultânea de imagens de vários comprimentos de onda com a mesma rapidez da taxa de vídeo.
A combinação do CSU22 com uma câmera colorida 3CCD de alta sensibilidade e alta resolução torna realidade a observação multicolorida simultânea sem a necessidade de substituição do filtro.
Observação do processo de formação do aparato de Golgi em leveduras em formação
Imagem em cores reais da formação do aparato de Golgi em levedura em brotamento (Saccharomyces cerevisiae). É possível reconhecer claramente que a cis-cisterna (EGFP) e o trans-cistema (RFP) se comportam de forma independente enquanto interagem dinamicamente um com o outro.
By courtesy of Dr.Akihiko Nakano , Molecular Membrane Biology Lab., Discovery Research Intitute , Riken & Prof .
Graduate School of Science , University of Tokyo.
Com o uso de um divisor de feixe em combinação com uma câmera CCD, é possível obter imagens simultâneas em duas cores em um nível de milissegundos.
Aquisição de imagens da microcirculação em pequenos animais vivos:
Imagens de lapso de tempo da formação de trombos intravasculares após irradiação a laser
0 seg
2 segundos
4 segundos
6 segundos
O movimento dinâmico de cada plaqueta individual (ponto indicado pela seta na imagem de "4 segundos" acima) pode ser claramente registrado na taxa de vídeo: plaquetas (verde), fibrinogênio (vermelho).
By courtesy of Dr. Hideo Mogami, Dept. of Physiology, Hamamatsu University School of Medicine
A redução do branqueamento da fluorescência e a geração de imagens em alta velocidade com o CSU22 são as melhores opções para a observação confocal FRET em tempo real!
Imagem em tempo real e em cores reais do estágio inicial da concentração de Ca2+ estimulada por histamina no citosol da célula HeLa que expressa o Cameleon (YC3.60)
Imagens FRET em taxa de vídeo: Trechos com intervalo de 264 ms
Imagens em cores reais
Imagens de proporção ( Pseudo-coloridas )
By courtesy of Dr. Atsushi Miyawaki, Advanced Technology Group, Brain Science Institute, Riken and Dr. Takeharu Nagai, Lab. for Nanosystems Physiology, Research Institute for Electronic Science, Hokkaido University.
Microscópios verticais
Microscópios invertidos
Observação: O CSU22 pode ser montado em microscópios de diferentes fabricantes
Especificações Gerais
Método de varredura confocal: | Varredura de disco Nipkow aprimorada por microlente |
Sincronização de vídeo: | Sincronização da velocidade de varredura por meio de sinais compostos NTSC ou PAL |
Sincronização externa: | Sincronização da velocidade de varredura por meio de sinais de pulso Entrada: nível TTL, 25 a 83,33 Hz Saída: nível TTL, 25 a 83,33 Hz (Correspondente à velocidade de rotação de um disco Nipkow de 1.500 a 5.000 rpm) |
Comprimento de onda de excitação: | Padrão (CH1): 488 nm Opcional (CH2): 532 ou 568 nm Opcional (CH3) : Vários comprimentos de onda (488, 568 e 647 nm) Entre em contato com Yokogawa para obter bandas de comprimento de onda diferentes do comprimento de onda padrão |
Filtro ND de luz de excitação: | 0% (sem luz), 10% e 100% (através) |
Entrada do feixe de laser: | Fibra monomodo conectada com conector FC |
Comprimentos de onda de fluorescência a serem observados: | Padrão ( CH1 ) : 520 nm ou mais Opcional ( CH2 ) : 570 nm ou mais, ou 600 nm ou mais Opcional ( CH3 ) : Comprimento de onda múltiplo (520 a 540 nm, 590 a 620 nm e 680 a 710 nm) Observação: Para canais sem filtros, o painel de proteção do laser será fixado no lugar dos filtros para segurança do laser. |
Comutação do caminho da luz: | Alternância manual entre a ocular para visão direta e a porta da câmera de montagem em C usando o botão de alternância de porta |
Operação painel: | Interruptor para abrir/fechar o obturador da luz de excitação Interruptor para selecionar um filtro ND Cinco combinações de filtros de comprimento de onda podem ser selecionadas em três grupos, cada um consistindo em três opções de filtro de excitação (EX), espelho dicroico (DM) e filtro de barreira (BA). |
Controle externo: | Interface RS-232C Requer o uso de uma chave e um cabo de intertravamento de conexão externa opcional (especifique Windows ou Macintosh). |
Suporte para microscópio: | Complemento usando um adaptador de montagem em C direto do microscópio |
Faixa de temperatura operacional: | 15 a 30 ℃. |
Faixa de umidade operacional: | 10 a 75% UR |
Energia consumo (unidade principal): | 12 V CC , 1 A |
Energia consumo (adaptador CA): | adaptador): Entrada: 100 a 240 V CA±10% , 50 ou 60 Hz , 74 VA máx. Saída: 12 V CC, 2,5 A máx. |
Dimensões externas (mais externas): | 183 (L) × 205 (C) × 245 (A) (mm) |
Weight: | 5 kg (unidade principal) |
Observação: Recomenda-se o uso de microscópio com correção de infinidade e lentes objetivas de alto NA (ou seja, Plan Apo).
As especificações gerais estão sujeitas a alterações sem aviso prévio. O modelo padrão não inclui nenhum componente periférico, como microscópio, unidade de laser, fibra óptica, câmera, monitor de imagem ou unidade de processamento de imagem. Para obter mais informações, entre em contato com o escritório indicado abaixo.
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