La herramienta más adecuada para obtener imágenes de células vivas.
La corriente principal de la investigación actual en ciencias de la vida es la observación de diversos procesos vitales en muestras vivas en tiempo real con un alto grado de sensibilidad y resolución, y un mínimo de fotoblanqueamiento y foto toxicidad. Basadas en su innovadora tecnología de exploración de disco Nipkow mejorada con microlente, las unidades CSU de Yokogawa se utilizan en todo el mundo como la herramienta más potente para la obtención de imágenes de células vivas.
Amplia aplicación: desde la obtención de imágenes de reacciones biológicas rápidas en milisegundos hasta la obtención de imágenes de alta resolución de muestras estáticas.
- Imágenes de alta resolución y lapso de tiempo de células vivas
- Imágenes de alta velocidad
- Reconstrucción 3D
- Observación 3D en tiempo real
- Observación dinámica multicolor
- Observación FRET de alta resolución y alta velocidad
Detalles
A diferencia de los sistemas confocales convencionales, el CSU utiliza cámaras CCD para capturar imágenes confocales. Aprovechando los rápidos avances en la capacidad de las cámaras CCD, cada vez es más posible adquirir imágenes de alta resolución a gran velocidad. Especialmente, la reducción significativa del fotoblanqueamiento y la foto toxicidad con CSU hace posible obtener imágenes de cambios delicados en células vivas, como la división celular o la diferenciación embrionaria en profundidad.
Observación de la división celular en un embrión de drosophila
Imágenes time-lapse de la división celular : ( centrómero : marcado con EGFP )
By courtesy of Dr. J.Sholey , Dr. D.Sharp : University of California , Davis
El barrido de alta velocidad de hasta 1.000 fotogramas/seg permite grabar reacciones a nivel de milisegundos
Imágenes de alta velocidad mediante una cámara CCD ultrarrápida con intensificador de imagen GenlV
Tiempo transcurrido desde la estimulación eléctrica :
16ms 20ms 24ms 28ms
Cambios postelectrostimulación en Ca2+ en células de músculo cardiaco ventricular de ratón marcadas con Fluo-3 , imágenes tomadas a intervalos de 4 ms.
By courtesy of Dr. Hideyuki Ishida , Dept. of Physiology , School of Medicine , Tokai University (in Japanese)
Los datos de reconstrucción 3D de células vivas pueden adquirirse fácilmente a partir de pilas de imágenes confocales nítidas captadas por una cámara CCD de alta resolución.
Imágenes construidas en 3D del cromosoma salival de drosophila ( etiquetado con PI ) (×60 aceite )
By courtesy of Dr. Yoshihiro Akimoto , Second Dept. of Anatomy
,School of Medicine , Kyorin University
En sincronización con el movimiento rápido de la lente del objetivo mediante un piezo-actuador y una cámara de alta velocidad, CSU22 le permite realizar escaneados 3D de alta velocidad de 30 o más imágenes transversales por segundo .
Ejemplo de aplicación
Reconstrucción 3D de objetos en movimiento
Seguimiento en 3D del comportamiento de C.elegans que expresan la proteína faríngea fusionada con EGFP (las imágenes en 3D se reconstruyeron tras adquirir cada una 30 imágenes transversales por segundo).
1seg.
2seg.
3seg
Imágenes 3D en tiempo real de la transducción de señales
Imágenes confocales de una sección
0 segundos
6 segundos
12 segundos
Proyección ( superposición ) de 30 imágenes transversales por segundo
Escaneado 3D de alta velocidad de reacciones de Ca2+ estimuladas por ácido glutámico en células nerviosas corticales cerebrales marcadas con Fluo-3
By courtesy of Dr. Atsuo Fukuda , Dept. of Physiology ,Hamamatsu University School of Medicine.
La CSU puede generar imágenes confocales en color real, por lo que puede utilizar una cámara 3CCD en color de alta sensibilidad, que permite obtener imágenes simultáneas de múltiples longitudes de onda con la misma rapidez que a velocidad de vídeo.
La combinación del CSU22 con una cámara en color 3CCD de alta sensibilidad y resolución hace realidad la observación multicolor simultánea sin necesidad de cambiar los filtros .
Observación del proceso de formación del aparato de Golgi en la levadura en ciernes
Imagen en color real de la formación del aparato de Golgi en la levadura en ciernes (Saccharomyces cerevisiae). Es posible reconocer claramente que la cis-cisterna ( EGFP ) y el trans-cistema ( RFP ) se comportan de forma independiente a la vez que interactúan dinámicamente entre sí.
By courtesy of Dr.Akihiko Nakano , Molecular Membrane Biology Lab., Discovery Research Intitute , Riken & Prof .
Graduate School of Science , University of Tokyo.
El uso de un divisor de haces en combinación con una cámara CCD permite obtener imágenes simultáneas en dos colores con una rapidez de milisegundos.
Imágenes de la microcirculación en pequeños animales vivos :
Imágenes secuenciales de la formación de trombos intravasculares tras la irradiación láser
0 segundos
2 segundos
4 segundos
6 segundos
El movimiento dinámico de cada plaqueta individual (punto indicado por la flecha en la imagen "4 seg" anterior) puede registrarse claramente a velocidad de vídeo: plaquetas (verde) , fibrinógenos (rojo).
By courtesy of Dr. Hideo Mogami, Dept. of Physiology, Hamamatsu University School of Medicine
La reducción del fotoblanqueo de la fluorescencia y la obtención de imágenes a alta velocidad con CSU22 es lo mejor para la observación confocal de FRET en tiempo real.
Imágenes en tiempo real y en color de la fase inicial de la concentración de Ca2+ estimulada por histamina en el citosol de células HeLa que expresan Cameleon ( YC3.60 )
Imágenes FRET a velocidad de vídeo : Extractos a intervalos de 264 ms
Imágenes en color real
Imágenes de relación ( Pseudocoloreadas )
By courtesy of Dr. Atsushi Miyawaki, Advanced Technology Group, Brain Science Institute, Riken and Dr. Takeharu Nagai, Lab. for Nanosystems Physiology, Research Institute for Electronic Science, Hokkaido University.
Microscopios verticales
Microscopios invertidos
Nota:El CSU22 puede montarse en microscopios de diferentes fabricantes
Especificaciones Generales
Método de barrido confocal: | Escaneado de disco Nipkow mejorado con microlente |
Sincronización de vídeo: | Sincronización de la velocidad de exploración mediante señales compuestas NTSC o PAL |
Sincronización externa: | Sincronización de la velocidad de exploración mediante señales de impulsos Entrada : Nivel TTL , 25 a 83,33 Hz Salida : Nivel TTL , 25 a 83,33 Hz (Correspondiente a una velocidad de giro de disco Nipkow de 1.500 a 5.000 rpm) |
Longitud de onda de excitación: | Estándar(CH1) : 488 nm Opcional(CH2) : 532 o 568 nm Opcional(CH3) : Múltiples longitudes de onda (488 , 568 y 647 nm) Contacte con Yokogawa para bandas de longitud de onda distintas de la estándar |
Filtro ND de luz de excitación: | 0% (sin luz) , 10% , y 100% (a través) |
Entrada del rayo láser: | Fibra monomodo conectada con conector FC |
Longitudes de onda de fluorescencia que deben observarse: | Estándar ( CH1 ) : 520 nm o superior Opcional ( CH2 ) : 570 nm o más, o 600 nm o más Opcional ( CH3 ) : Multi-longitud de onda ( 520 a 540 nm , 590 a 620 nm , y 680 a 710 nm ) Nota : Para los canales sin filtros , el panel de protección láser se fijará en lugar de los filtros para la seguridad del láser. |
Conmutación de la trayectoria de la luz: | Conmutación manual entre el ocular para visión directa y el puerto para cámara con montura C mediante el mando de conmutación de puertos. |
Operación panel: | Interruptor para abrir/cerrar el obturador de la luz de excitación Interruptor para seleccionar un filtro ND Se pueden seleccionar cinco combinaciones de filtros de longitud de onda de tres grupos, cada uno de los cuales consta de tres opciones de filtro de excitación (EX), espejo dicroico (DM) y filtro de barrera (BA). |
Control externo: | Interfaz RS-232C Requiere el uso de un cable y una llave de enclavamiento de conexión externa opcionales (especifique Windows o Macintosh). |
Montura de microscopio: | Complemento mediante un adaptador directo de montura C del microscopio |
Temperatura de funcionamiento: | 15 a 30℃ |
Rango de humedad de funcionamiento: | 10 a 75% HR |
Energía consumo (unidad principal): | 12 V CC , 1 A |
Energía consumo (adaptador de CA): | adaptador): Entrada : 100 a 240 V AC±10% , 50 o 60 Hz , 74 VA máx. Salida : 12 V CC , 2,5 A máx. |
Dimensiones exteriores (más externas): | 183 (ancho) × 205 (largo) × 245 (alto) (mm) |
Weight: | 5 kg (unidad principal) |
Nota : Se recomienda el uso de microscopios con corrección Infinity y lentes objetivo de alta NA (es decir, Plan Apo).
Las especificaciones generales están sujetas a cambios sin previo aviso. El modelo estándar no incluye ningún componente periférico como microscopio, unidad láser, fibra óptica, cámara, monitor de imagen o unidad de procesamiento de imagen. Para más información, póngase en contacto con la oficina indicada a continuación.
¿En busca de información adicional sobre Yokogawa Iberia, tecnología y soluciones?
Contáctenos