Sistema de cribado de alto contenido CellVoyager CV8000

Un método patentado de exploración múltiple Yokogawa que utiliza aproximadamente 1.000 rayos láser en la región de observación y discos en tándem que giran a gran velocidad. Los discos constan de un disco de matriz de agujeros de alfiler con aproximadamente 20.000 agujeros de alfiler dispuestos en un patrón espiral de igual paso, y un disco de matriz de microlentes que enfoca el láser de luz de excitación en agujeros de alfiler individuales. Esto no sólo permite obtener imágenes a alta velocidad, sino que también evita en gran medida la fototoxicidad y el fotoblanqueo de la fluorescencia.

Pueden utilizarse dos tipos diferentes de discos estenopeicos (25/50μm), en función de la muestra. En el caso de muestras gruesas, la reducción del diámetro de los agujeros de alfiler permite obtener imágenes de mayor confocalidad y más perfiladas. Para muestras oscuras, aumentar el diámetro del agujero de alfiler permite obtener imágenes más brillantes.

Ejemplo de imagen de organoide Agujero superior：25μm Agujero inferior：50μm.

La configuración del sistema óptico puede seleccionarse en función del objetivo. Una sola placa de 96 pocillos se puede visualizar en cuatro colores en un minuto conectando cuatro cámaras sCMOS de campo amplio y alta sensibilidad. El sistema también es compatible con los ensayos FRET y CellPainting.

Los objetivos de inmersión en agua destacan en la captura de imágenes de alta resolución de células dentro de un líquido. La CV8000 puede equiparse con objetivos de inmersión en agua de 20x, 40x o 60x. Nuestro objetivo 40x es un objetivo especialmente exclusivo capaz de realizar una corrección muy avanzada de la aberración esférica, lo que permite capturar imágenes brillantes de alta resolución en todo el campo de visión. El suministro de agua del objetivo también está completamente automatizado. Este equipo hace posible el cribado de alto rendimiento mediante lentes de inmersión en agua.

La incubadora de platina tiene una construcción hermética que controla la humedad, la temperatura y el CO ₂ niveles. La pipeta robótica integrada realiza el siguiente proceso de forma totalmente automática: recogida de la punta → recogida del reactivo de la placa de reactivos → adición del reactivo a la placa de muestras → eliminación de la punta. No sólo se pueden obtener imágenes rápidamente antes y después de la instilación de reactivos, sino que también es posible añadir reactivos a pocillos individuales varias veces, y ajustar la velocidad de adición, etc., ampliando el rango de observación de la dinámica mediante la instilación de reactivos.

Comparación de la multiplicación celular con el _{incubador de CO2} normal tras 72 horas de incubación（n=3）.

• 96 pozo media: 90
• Media de los 36 pozos más alejados: 81
• Media de 60 pozos (excluidos los más alejados): 96

Los valores representan lo siguiente Área total del CV8000 después de 72 horas / Área total a las 0 horas (en lo sucesivo, proporción de área total) / proporción de área total _{del incubador de CO2} x 100.
(Los números cercanos a 100 me indican que la multiplicación celular fue aproximadamente igual para CV8000 y _CO2incubator).
Se verificó una multiplicación celular cercana a la del _CO2incubador, excluyendo los cuatro pocillos de las esquinas.

Curvas de multiplicación celular para cada pocillo de una placa de 96 pocillos

• Eje vertical: Superficie total
• Eje horizontal: Tiempo (0-72 horas)

La multiplicación celular fue baja en los cuatro pocillos de las esquinas; sin embargo, continuó en los demás pocillos.

Proporción de superficie total tras el inicio del cultivo (24, 48 y 72 horas) (n=3)

Excluyendo los cuatro pocillos de las esquinas, incluso después de 72 horas, no se observaron grandes diferencias en la multiplicación celular.
Se puede observar la escasa variación en la velocidad de multiplicación celular entre los pocillos 24 horas 48 horas 72 horas.